膜再生液Stripping buffer

膜再生液

Stripping buffer 

简介：

Western

抗体洗脱液

(Stripping buffer)

又称膜再生液或

Western

一抗二抗去除液，

用于

Western

中转移了蛋白的膜的重复利用。在

Western

中完成了一抗二抗结合和后续

的化学发光检测后，有时还需要检测

GAPDH

、

β

-actin

等表达量相对稳定的管家蛋白或其

它蛋白作为参照。

Western Stripping buffer 

主要依靠碱性来解除一抗二抗的结合，

同时

又不会导致转移到膜上的蛋白的损失，

适用于

Western

化学发光检测后的蛋白膜的重复

利用，尤其适用于

PVDF

膜，其次为硝酸纤维素膜。

组成：

操作步骤

(

仅供参考

)

：

1

、在膜完成

Western

化学发光检测后，蒸馏水中漂洗。

2

、弃蒸馏水，加入

Western Stripping buffer

，完全覆盖住膜。

3

、摇床上漂洗。

4

、弃液，尽量把

Western Stripping buffer

去除干净，必要情况下，可以用滤纸吸干。

5

、加入蒸馏水振荡漂洗

2

～

3

次，每次漂洗。

6

、入封闭液进行封闭后

(

推荐酪氨酸或脱脂奶粉作为封闭液

)

，进行

Western

后续操作。

注意事项：

1

、

使用辣根过氧化物酶标记的抗体时，封闭液必须使用

5%

脱脂奶粉配制。

2

、

Western Stripping buffer(

碱性

)

特别适用于

PVDF

膜的再生，硝酸纤维素膜的再生效

果不如

PVDF

膜。

3

、

Western Stripping buffer(

碱性

)

适用于

ECL

等类似的化学发光液的检测后的一抗二抗

洗脱。非化学发光试剂进行的

Western

检测

(

如

DAB

，

NBT/BCIP)

不适用于本试剂。

4

、

Western Stripping buffer(

碱性

)

有轻微腐蚀性，使用时请注意防护。

5

、

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。